- 王梦雨;蔡璐璐;孙羽佳;孟青青;金鑫浩;田茜;赵文军;
严格的种子检疫是控制病原体跨区域远距离传播的最有效方法之一。瓜类细菌性果斑病、黄瓜细菌性角斑病、黄瓜绿斑驳花叶病毒病和黄瓜黑星病均是严重危害瓜类作物的重要病害。本研究基于微流控和实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qPCR)技术,结合核酸提取纯化、多目标快速扩增和结果可视化技术,对上述瓜类作物重要病原物进行多重检测。整个检测过程仅需36 min,瓜类细菌性果斑病菌最低检测限为2.1×10~3CFU/mL,黄瓜细菌性角斑病菌最低检测限为2.4×10~3CFU/mL,黄瓜绿斑驳花叶病毒最低检测限为1.0×10~1copies/μL,黄瓜黑星病菌最低检测限为1.7×10~(-3)ng/μL。使用该方法检测了47份瓜类实际样品,与实验室q PCR方法的检测结果一致。该方法摆脱了对实验室和专业技术人员的依赖,有助于提高植物有害生物的现场检测技术水平。
2025年06期 v.39 19-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 1499K] [下载次数:7 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 牟桂萍;许然;胡加谊;黎玮琪;曾杨森;易建平;
从进境加拿大油菜籽中分离到一株疑似十字花科细菌性疫病菌(Pseudomonas cannabina pv. alisalensis,Pca)的分离物,对其进行检测和鉴定。通过形态学观察、PCR检测、16S rRNA及多位点序列分析、系统发育树构建、致病性测试对分离物1121-H1进行鉴定,结果表明,分离物在MT培养基上菌落呈无色至浅白色,培养3 d后直径不超过1.5 mm,形态为圆形至椭圆形,扁平,边缘略有不规则,且不产生水解圈,培养5 d后产生红褐色色素;Pca特异引物hrpK_fw1/ALS_rv1和hrpK_fw2/ALS_rv2能扩增分离物1121-H1的DNA,得到预期特异条带;分离物1121-H1的16S rRNA序列与GenBank中Pca菌株ES4326和MAFF301419的序列一致,相似性为100.00%;选择gltA、gap1、ropD、pgi、gyrB和acnB等6个看家基因进行多位点序列分析,每段看家基因序列均与Pca菌株NCPPB1820的序列一致,相似性为100.00%;系统发育树显示分离物1121-H1与Pca相关菌株处于同一分支,与假单胞菌属其他菌株处于不同分支;致病性测试显示,涂抹接种后叶片出现褐色坏死斑伴黄绿色晕圈,针刺接种后病斑扩展并伴随组织塌陷,符合Pca典型症状。本研究是国内首次对Pca进行分离和鉴定,为口岸截获Pca提供了科学依据。
2025年06期 v.39 28-34页 [查看摘要][在线阅读][下载 1557K] [下载次数:11 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 张凯;朱雅君;
楔天牛属幼虫是口岸截获的重要木材害虫。由于研究基础相对薄弱,因此该类群形态鉴定难度较大。本文对上海口岸常见的侧纹楔天牛(Saperda lateralis)、青杨楔天牛(S. populnea)、梯楔天牛(S. scalaris)、密点楔天牛(S. similis)的幼虫进行了详细形态描述,提供了楔天牛族、楔天牛属天牛幼虫的形态特征及已描述幼虫的形态学检索表,为实验室工作人员提供鉴定参考。
2025年06期 v.39 35-40+42页 [查看摘要][在线阅读][下载 1722K] [下载次数:4 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 王哲;袁小雅;黄迎波;严珺;王宝怡;莫瑾;
为建立一种快速、准确、可靠的稻粒黑粉病菌活性检测方法,有助于加快口岸对具有活性的病菌检测,同时为其风险评价、除害处理提供科学依据,本研究以稻粒黑粉病菌(Tilletia horrida Tak.)菌株为供试材料,对6种荧光染料分别设置的3种浓度和3种染色时间不同组合的染色效果进行比较,在冬孢子形态完整的情况下6种荧光染料皆无法明显区分稻粒黑粉菌的活性冬孢子与121℃处理30 min的失活冬孢子。而在外力破损染色后的冬孢子,使其内容物流出后发现碘化丙啶染色后的死冬孢子流出的内容物发红色荧光,活冬孢子不发光,可以明显区分活冬孢子和死冬孢子。本研究初步建立了碘化丙啶(PI)基于荧光染色的稻粒黑粉病菌的活性检测方法,能够对其冬孢子进行活性检测,从制样到检测完成仅需约40 min,可用于口岸对该病菌的活性检测。
2025年06期 v.39 43-47页 [查看摘要][在线阅读][下载 1517K] [下载次数:3 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 黄艳;王新国;许然;胡加谊;华展义;牟桂萍;江志海;张海鹏;曾杨森;邓雪华;
苏铁是重要的景观和“活化石”植物,而苏铁白轮蚧(Aulacaspis yasumatsui Takagi,1977)是苏铁目前面临的最大威胁。为了准确鉴定苏铁上的白轮蚧种类,本文采用直接观察、玻片显微观察及扫描电镜观察3种方法,对比分析了苏铁白轮蚧与玫瑰白轮蚧[A. rosae(Bouché,1833)]的形态特征,并结合基因条形码技术进行了验证。结果表明,玫瑰白轮蚧体长(1.21±0.08 mm)明显大于苏铁白轮蚧(0.85±0.11 mm);玫瑰白轮蚧前体与后体之间缢缩明显,后体前3节侧突明显,前气门腺20个左右,而苏铁白轮蚧前体与后体之间缢缩不明显,后体前3节侧突不明显,前气门腺30个左右;基于COI基因片段的基因条形码技术能有效区分两种白轮蚧。以上说明基于裸虫体形态特征、玻片显微结构及扫描电镜超微结构的比较分析,可实现对苏铁上两种白轮蚧的准确鉴别。
2025年06期 v.39 48-56页 [查看摘要][在线阅读][下载 2140K] [下载次数:48 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 吴晶;郭静;伏建国;杨晓军;张新第;马元伟;梁建国;李井干;
糙果苋(Amaranthus tuberculatus)是当前美国农田的一种恶性杂草,已对多种除草剂产生了抗药性,可造成农作物大量减产。进口美国大豆、玉米等粮谷中经常截获糙果苋种子。为了准确、快速地鉴定糙果苋种子,本文设计了糙果苋特异性引物探针,利用核酸快释技术,改进了实时荧光PCR仪的升降温速度,可以在30 min左右准确检测出进境粮谷中携带的单粒糙果苋种子。该技术大大缩短了进口粮谷中糙果苋的检疫鉴定时间,还可应用于口岸一线杂草监测工作。
2025年06期 v.39 57-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 1687K] [下载次数:5 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 李春雷;王溪桥;史琳;李亚平;杨岚清;
马铃薯T病毒(potato virus T,PVT)是马铃薯的重要病害之一。为建立快速、准确、灵敏、规范的检测方法以促进马铃薯顺利出口,本研究根据PVT外壳蛋白(coat protein,CP)基因设计3组引物及TaqMan探针,通过引物筛选确定最佳引物组合,利用常规PCR方法及实时荧光PCR方法进行了特异性检测和灵敏度比较。结果表明,本研究建立的PVT实时荧光PCR检测方法特异性好,与参试的马铃薯A病毒、马铃薯X病毒、马铃薯Y病毒、马铃薯黄矮病毒、李痘病毒无交叉反应;灵敏度高,最低检测浓度可达66fg/μL。本研究构建的马铃薯T病毒实时荧光PCR检测鉴定体系,可为马铃薯繁殖材料的快速检测提供技术支持。
2025年06期 v.39 62-66页 [查看摘要][在线阅读][下载 1819K] [下载次数:8 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 钟勇;白华菊;黄静;马福欢;陈舒娴;陈展册;梁琨;杜智欣;
冕盾蚧广泛发生于新热带区,是香蕉等经济作物的重要害虫。本文介绍了冕盾蚧的分类地位、地理分布、寄主植物、危害及经济意义、鉴定特征等信息,并提供了冕盾蚧分种检索表,以期为相关部门对冕盾蚧的检疫鉴定提供参考。
2025年06期 v.39 67-70页 [查看摘要][在线阅读][下载 1855K] [下载次数:7 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ]